Questi cani grandi e potenti hanno un temperamento calmo e uniforme. Sono estranei agli sbalzi d'umore improvvisi, all'impulsività e all'eccessiva emotività, sebbene siano molto affettuosi con la loro famiglia, mostrano grande amore e devozione. D'altra parte, nonostante le qualità di cui sopra, la fermezza di carattere e la consapevolezza della propria forza e potenza, a volte rendono il cane troppo indipendente, soprattutto se il proprietario ha un carattere tenero e indeciso. Dopotutto, un tale animale domestico ha bisogno di una mano ferma e sicura.
Il Mastino Napoletano è una razza perfetta per custodire la tua proprietà, sia essa un appartamento o una casa privata. Da un lato, non gli piace molto abbaiare e lo fanno in modo un po' moderato, dall'altro il cane non lascerà mai intrusi nel suo territorio.